Enzymová kinetika - jednosubstrátové reakce

Rychlost

• Počáteční rychlost v0 = rychlost reakce v čase 0 - bez zpětné reakce
  • Zanedbání inhibice produktem, denaturací [S] >> [E]
• Měření rychlosti
  • Měření koncentrace produktu v několika intervalech
  • Zvolení rozmezí, kdy v = v0

Michealis-Menten

• v0 = d[P]/dt = k2[ES]
• koncentrace enzymu: [E]0 = [E] + [ES]
• předpoklad ustáleného stavu: [ES] = konst
• d[ES]/dt = k1[E][S] - k-1 - k2[ES] = 0
• [E] = [ES](k-1 + k2)/(k1[S])
• [E]0 = (k-1 + k2)/(k1[S]) * …..
• v0 = k2[ES] = (k2[E]0[S])/(KM + [S])
• KM = (k-1 + k2)/k1
• v0 = Vlim[S]/(KM + [S])
• průběh
  • [S] << KM - knietika 1. Řádu
  • [S] >> K - kinetika 0. Řádu (v = vlim)
  • zbytek - nedefinovaný řád
• za předpokladu k2 << k-1 : KM = k-1/k1 = Kd(ES)